배양된 흰쥐 담관 섬유모세포에 대한 간흡충 분비배설 물질의 영향

Abstract

간흡충(Clonorchis sinensis)은 우리나라에서 높은 감염률(2.9 %)을 나타내는 기생충으로(KAHP, 2004), 간흡충에 감염된 담관 은 간흡충의 흡반에 의한 물리적 자극과 대사산물 및 분비물 등 의 화학적 자극에 의해 담관염이 일어나고, 간흡충이 성장할 때 충체 주위의 담관 상피세포의 증식, 탈락, 담관 주위의 염증 및 섬유화가 일어난다. 담관 점막에 분포하는 섬유모세포는 결합조 직을 구성하는 세포의 한 종류로서 세포질돌기들이 잘 발달된 형태적 특징이 있으며, 세포질 내에 세포의 형태 유지, 신호전달, 인접세포와의 연접 등에 관여한다. 또한 조직을 발달시키고, 조 직이 손상된 부위에서 콜라겐 층을 형성하여 손상된 조직이 복 구되도록 하기도 한다. 상처의 반흔(scar) 형성과 지방축적, 염증 (inflammation) 발생 과정에서 섬유모세포의 작용이 제대로 조절 되지 못하면 섬유증(fibrosis)이 발달하게 된다는 연구 보고도 있다. 본 연구에서는 정상 흰쥐에서 분리된 담관 섬유모세포와 간흡 충 감염 흰쥐에서 분리된 담관 섬유모세포를 배양하고, 각각의 실험군에 간흡충 분비배설 물질(Cs excretory-secretory product, ESP)을 첨가하여 배양하였다. 배양된 섬유모세포의 미세구조 변 화와 세포 표면에 존재하는 sialic acid 및 actin의 분포를 전자현 미경으로 관찰하여, 간흡충 감염에 따른 섬유모세포의 변화 및 간흡충 분비배설 물질의 자극에 따른 섬유모세포의 변화를 관찰 하여 흰쥐의 담관 섬유모세포와 간흡충 감염과의 연관성을 알아 보고자 하였다. 정상 흰쥐 담관에서 분리한 섬유모세포(G1)에 비하여 간흡충 에 감염된 흰쥐 담관에서 분리한 섬유모세포(G2)와 간흡충 분 비배설 물질을 첨가하여 배양한 섬유모세포(G1-1, G2-1)의 증식 속도가 느린 것이 확인되었다. 세포질돌기의 수는 간흡충에 감염 된 흰쥐의 담관으로부터 분리된 섬유모세포(G2)에서 가장 많은 수가 관찰되었고, 배양배지에 분비배설 물질을 첨가하면 정상 담 관의 섬유모세포에서도 세포질돌기가 증가하였다. 따라서 간흡 충 대사물질은 섬유모세포의 세포질돌기형성을 촉진시키는 것으 로 생각된다. 간흡충에 감염된 흰쥐 담관에서 분리한 섬유모세 포(G2)의 소포체는 정상 담관에서 분리된 섬유모세포(G1)의 것 에 비하여 감소하는 양상을 나타내었고, 여기에 분비배설 물질을 첨가하면 섬유모세포의 소포체가 증가하는 것이 관찰되었다. 그 리고 세포표면에 분비되는 sialic acid는 주로 세포질의 소포낭 주변에서 관찰되었으며, 정상 섬유모세포(G1, G1-1)보다 감염된 섬유모세포(G2, G2-1)에서 증가하였다. Actin은 세포표면과 세 포질돌기에서 주로 관찰되었으며, 정상 섬유모세포(G1, G1-1)보 다 감염된 섬유모세포(G2, G2-1)에서 반응이 증가하였고, 간흡 충 분비배설 물질을 첨가하면 G1-1은 반응이 증가하고, G2-1은 반응이 감소하는 것이 관찰되었다. 이상의 결과로 간흡충에 감염된 흰쥐 담관의 섬유모세포는 세 포질돌기들이 매우 발달하며, actin단백과 sialic acid가 증가하여 세포변형을 초래하게 된다. 또한 간흡충 감염으로 손상된 담관의 섬유모세포로 구성된 결합조직은 정상으로 회복되지 않으며, 세 포질 부피 및 세포질돌기의 증가는 이루어지지만 간흡충 대사물 질의 영향으로 섬유모세포의 분열 및 성장 속도가 억제되는 것 으로 확인되었다. 이 결과 간흡충 감염으로 손상된 숙주의 담관 결합조직과 섬유모세포들은 간흡충 대사물질에 의하여 변형을 일으키고, 세포 활성 및 증식이 저하되므로 팽대된 담관은 간흡 충이 사멸된다 하더라도 원상회복이 불가능할 것으로 생각된다.